Resumen

Las enfermedades priónicas están relacionadas con la acumulación de una isoforma mal plegada (PrPSc) de la proteína priónica (PrP). Las pruebas sugieren que los lisosomas son puntos finales de degradación y lugares de acumulación de PrPSc. Nos preguntamos si los lisosomas participan en el control de calidad temprano de la PrP mal plegada recién generada. Descubrimos que la PrP portadora de la mutación T182A asociada a la enfermedad (Mut-PrP) era transportada a los lisosomas de forma independiente del Golgi. Las imágenes de células vivas con lapso de tiempo revelaron la formación temprana y la captación de agregados de Mut-PrP marcados con GFP en vesículas marcadas con LysoTracker. En comparación con Wt-PrP, la expresión de Mut-PrP se asoció con un aumento de varios marcadores de la vía autofagia-lisosomal, y se colocalizó extensamente con el marcador específico de autofagosoma, LC3B. En fibroblastos embrionarios de ratón deficientes en autofagia (ATG5-/-), o en células normales tratadas con el inhibidor de la autofagia 3-MA, la colocalización de Mut-PrP con los lisosomas se redujo en una medida similar. Además, la 3-MA afectó selectivamente a la degradación de la Mut-PrP insoluble, dando lugar a un aumento de la PrP resistente a la proteasa, mientras que la inducción de la autofagia mediante rapamicina la redujo. Estos hallazgos sugieren que la autofagia podría funcionar como un mecanismo de control de calidad para limitar la acumulación de PrP mal plegada que normalmente conduce a la generación de PrPSc.

• Materias:Biología molecular Genes mitocondriales Proliferación celular Receptor celular Pliegue de Proteína
• Subjects:Molecular biology Mitochondrial genes Cell proliferation Cellular receiver Protein Folding
• Palabras claves:PrP, autofagia, Mut, lisosomas, PrPSc, acumulación, control de calidad temprano, imágenes de células vivas, mecanismo de control de calidad, MA
• Keywords:PrP, autophagy, Mut, lysosomes, PrPSc, accumulation, early quality control, live cell imaging, quality control mechanism, MA