Resumen

Aunque el ensayo Comet, un procedimiento para cuantificar el daño del ADN en células de mamíferos, se considera sensible, nunca se ha comprobado que su sensibilidad sea superior a la de otros ensayos de genotoxicidad en células de mamíferos. Para determinar si el poder del ensayo Comet para detectar un bajo nivel de potencial genotóxico es superior al de otros ensayos de genotoxicidad en células de mamíferos, comparamos los resultados del ensayo Comet con los del test de micronúcleos (test MN). Las células linfoblastoides humanas WTK1 se expusieron a nitrosourea de metilo (MNU), nitrosourea de etilo (ENU), metanosulfonato de metilo (MMS), metanosulfonato de etilo (EMS), bleomicina (BLM) o UVC. En el ensayo Comet, las células se expusieron a cada mutágeno con (ensayo Comet/araC) y sin (ensayo Comet) inhibidores de la reparación del ADN (araC e hidroxiurea). Además, se realizó el ensayo Comet acelular (ensayo acelular) para determinar cómo las roturas de cadena única (SSB) como daño inicial contribuyen a la migración del ADN y/o a la formación de micronúcleos. La dosis genotóxica más baja (LGD), que se define como la dosis más baja a la que cada mutágeno provoca una respuesta positiva en cada ensayo de genotoxicidad, se utilizó para comparar la potencia del ensayo Comet para detectar un nivel bajo de potencial genotóxico y la del ensayo MN; es decir, una LGD baja indica una potencia alta. Los resultados se resumen como sigue (1) para todos los mutágenos estudiados, las LGD fueron ensayo MN ≦ ensayo Comet; (2) excepto para BLM, las LGD fueron ensayo Comet/araC ≦ ensayo MN; (3) excepto para UVC y MNU, las LGD fueron ensayo acelular ≦ ensayo Comet/araC ≦ ensayo MN ≦ ensayo Comet. Los presentes hallazgos sugieren lo siguiente: (1) la LGD en el ensayo Comet es superior a la del ensayo MN, lo que sugiere que la potencia del ensayo MN para detectar un bajo nivel de potencial genotóxico es superior a la del ensayo Comet; (2) para los mutágenos estudiados, todos los ensayos fueron capaces de detectar correctamente todos los mutágenos, lo que sugiere que la sensibilidad del ensayo Comet y la del ensayo MN eran exactamente idénticas; (3) el poder del ensayo Comet para detectar un bajo nivel de potencial genotóxico puede elevarse a un nivel superior al del ensayo MN utilizando inhibidores de la resíntesis del ADN, como araC y HU.

• Materias:Pliegue de Proteína Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos Reparación del ADN Daño del ADN
• Subjects:Protein Folding Polymerase chain reaction Nucleic acids DNA Repair DNA Damage
• Palabras claves:ensayo cometa, ensayo mn, potencial genotóxico, bajo nivel, otros ensayos de genotoxicidad, células de mamífero, arac, potencia, lgds, mutágenos
• Keywords:comet assay, mn test, genotoxic potential, low level, other genotoxicity assays, mammalian cells, arac, power, lgds, mutagens