Resumen

Para preparar el anticuerpo monoclonal (MAb) antiglicirricina (GC), se trató la GC con NaIO4 dando lugar a un aldehído que puede combinarse con la proteína portadora. Se realizó un conjugado de antígenos mediante espectrometría de masas TOF de desorción/ionización láser asistida por matriz para determinar el número de haptenos en el conjugado. El MAb anti-GC se preparó a partir de un hibridoma que se fijó a partir de las células del bazo productoras de MAb anti-GC y las células del mieloma tras la inmunización. El TCM y el extracto de regaliz se revelaron mediante TLC y se cubrieron con una membrana de difluoruro de polivinilideno (PVDF). La membrana se trató con NaIO4 y se añadió proteína, MAb secundaria marcada con enzima y, por último, sustrato. Apareció una mancha clara en la membrana de PVDF que identificaba el GC sobre un fondo que contenía gran cantidad de impurezas. En el eastern blotting, la molécula de GC se dividió en dos funciones. La parte de aglicona se reconoce como epítopo y la fracción de azúcar puede combinarse con la membrana. La reactividad específica de la fracción azucarada de la molécula de GC frente al MAb anti-GC podría verse modificada por el tratamiento con NaIO4 de la membrana, ya que el ácido glicirrético 3-O-glucurónido puede teñirse, aunque la reactividad cruzada es sólo del 4,3%. El Eastern blotting para GC no sólo puede aplicarse a la estandarización del regaliz y la MTC, sino que también puede abrirse a otros productos bioactivos.

• Materias:Reacciones químicas Biología molecular Química farmacéutica Química analítica Química de los alimentos
• Subjects:Chemical reactions Molecular biology Chemistry pharmaceutical Analytical chemistry Food chemistry
• Palabras claves:gc mab, membrana, molécula gc, fracción de azúcar, ionización tof espectrometría de masas, otros productos bioactivos, tcm, clear spot, eastern blotting, tratamiento naio4
• Keywords:gc mab, membrane, gc molecule, sugar moiety, ionization tof mass spectrometry, other bioactive products, tcm, clear spot, eastern blotting, naio4 treatment