Resumen

El objetivo de este estudio es establecer y validar un método rápido, selectivo y sensible de cromatografía líquida de ultra-rendimiento-espectrometría de masas en tándem (UPLC-MS/MS) para determinar tubeimosida I (TBMS-I) en sangre total de ratón ICR (Institute of Cancer Research) y su aplicación en el estudio de farmacocinética y biodisponibilidad. Las muestras de sangre se precipitaron con acetonitrilo para extraer los analitos. La separación cromatográfica se realizó en una columna UPLC BEH C18 (2,1 mm × 50 mm, 1,7 μm). La fase móvil consistió en agua con ácido 0,1órmico y metanol (1 : 1, v/v) a un caudal de 0,4 mL/min. El tiempo total de elución fue de 4 min. La TBMS-I y la ardisiacrispina A (patrón interno (IS)) se detectaron cuantitativamente mediante espectrometría de masas en tándem equipada con ionización por electrospray (ESI) en modo positivo por monitorización de reacción múltiple (MRM). La validación de este método se realizó de acuerdo con las directrices de la Food and Drug Administration (FDA) de Estados Unidos. El límite inferior de cuantificación (LLOQ) de TBMS-I fue de 2 ng/mL, y la curva de calibración tuvo un rango lineal de 2 a 2000 ng/mL (r2 ≥ 0,995). La desviación estándar relativa (RSD) de la precisión interdiaria e intradiaria fue inferior al 15%, y la exactitud se situó entre el 91,7 a 108,0%. La recuperación media fue >66,9%, y los efectos de matriz oscilaron entre 104,8% y 111,0%. En este ensayo se desarrolló y validó por primera vez en sangre de ratón un método cuantitativo rápido, altamente sensible y reproducible. La disponibilidad absoluta de TBMS-I en el ratón fue sólo del 1%, lo que muestra una absorción oral deficiente.

• Materias:Análisis cromatográfico Química farmacéutica Estructura molecular Análisis químico Análisis espectroquímico
• Subjects:Chromatographic analysis Chemistry pharmaceutical Molecular structure Chemical test Spectrochemical analysis
• Palabras claves:espectrometría de masas en tándem, tbms, columna uplc beh c18, monitorización de reacciones múltiples, cromatografía líquida de alto rendimiento, absorción oral deficiente, desviación estándar relativa, método, min, ratón
• Keywords:tandem mass spectrometry, tbms, uplc beh c18 column, multiple reaction monitoring, performance liquid chromatography, poor oral absorption, relative standard deviation, method, min, mouse