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Investigation on the Aggregation Behaviors and Filament Morphology of Tau Protein by a Simple 90° Angle Light-Scattering AssayInvestigación sobre los Comportamientos de Agregación y Morfología de Filamentos de la Proteína Tau mediante un Sencillo Ensayo de Dispersión de Luz a 90°.

Resumen

La agregación de los constructos de tau fue monitoreada mediante un enfoque simple de dispersión de luz a 90 grados (LS), que se llevó a cabo directamente en un instrumento de fluorescencia. En la longitud de onda incidente óptima (550nm, no polarizada), la sensibilidad de LS fue lo suficientemente alta como para detectar la agregación de tau en el rango micromolar. La nucleación y elongación, eventos diferentes en el proceso de agregación del constructo 4RMBD (correspondiente a las cuatro unidades repetidas del Dominio de Unión a Microtúbulos de tau) pudieron ser observados mediante este enfoque, en comparación con el ensayo de fluorescencia ThS. La validez de esta técnica se demostró en un rango de concentraciones de tau con diferentes filamentos de tau. La regresión lineal de la luz dispersada contra la concentración arrojó la intersección, las concentraciones críticas de los constructos de tau. Las concentraciones críticas de 4RMBD y su mutante S305N son de 5

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  • Formato:pdf
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