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Transfection Studies with Colloidal Systems Containing Highly Purified Bipolar Tetraether Lipids from Sulfolobus acidocaldariusEstudios de transfección con sistemas coloidales que contienen tetraéteres lipídicos bipolares altamente purificados de Sulfolobus acidocaldarius

Resumen

Los vectores lipídicos se utilizan habitualmente para facilitar la transferencia de ácidos nucleicos a células de mamíferos. En este estudio, se extrajeron y purificaron dos fracciones de lípidos tetraéteres de la archaea Sulfolobus acidocaldarius utilizando diferentes métodos. Las fracciones de lípidos purificados, la fracción de lípidos polares E (PLFE) y el tetraéter de glicerol-dialquil-nonitol hidrolizado (hGDNT), difieren en sus estructuras, carga, tamaño y miscibilidad de los lípidos convencionales. Los liposomas se prepararon mezclando lípidos de tetraéter con colesterol (CH) y 1,2-dioleoyl-3-trimetilamonio-propano (DOTAP), lo que dio lugar a vectores estables para la administración de genes. Los lipoplejos se prepararon mediante la complejación de liposomas con un plásmido que expresa luciferasa (pCMV-luc) a determinadas relaciones nitrógeno-fósforo (N/P) y se optimizaron para la transfección transitoria de células de adenocarcinoma de ovario (SK-OV-3). La eficacia de la complejación se investigó mediante un ensayo de fluorescencia en gel rojo. Las propiedades biofísicas, como el tamaño, la carga superficial y la morfología, se investigaron mediante dispersión de luz diferencial (DLS), microscopía de fuerza atómica (AFM) y microscopía electrónica de barrido (Cryo-SEM), respectivamente, revelando diferencias estructurales entre los liposomas y los lipoplejos. Se obtuvo una gama de agentes transfectantes estables que contenían lípidos de tetraéter mediante la incorporación de un 5 mol% de lípidos de tetraéter. Los lipoplexes mostraron una disminución del gel-rojo libre con el aumento de las relaciones N/P, lo que indica una incorporación eficaz del ADN plasmídico (ADNp) y una notable estabilidad. Los experimentos de transfección de los lipoplejos revelaron una transfección exitosa y superior de la línea celular SK-OV-3 en comparación con el DOTAP y la polietilenimina ramificada (25 kDa bPEI) disponibles en el mercado.

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  • Idioma:Inglés
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Información del documento

  • Titulo:Transfection Studies with Colloidal Systems Containing Highly Purified Bipolar Tetraether Lipids from Sulfolobus acidocaldarius
  • Autor:Konrad H., Engelhardt; Shashank Reddy, Pinnapireddy; Elias, Baghdan; Jarmila, Jedelská; Udo, Bakowsky
  • Tipo:Artículo
  • Año:2017
  • Idioma:Inglés
  • Editor:Hindawi
  • Materias:Dióxido de carbono Genes Metabolismo (Bioquimica) Arqueas metanogénico
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