Resumen

Los fibroblastos primarios humanos son un tipo popular de células somáticas para la producción de células madre pluripotentes inducidas (iPS). Aquí caracterizamos las propiedades biológicas de los fibroblastos primarios en términos de tasa de crecimiento celular, estabilidad citogenética y número de cromosomas X inactivos durante el paso a largo plazo. Produjimos ocho líneas de fibroblastos dérmicos humanos femeninos (HDFs) y encontramos un cariotipo normal y el patrón esperado de inactivación del cromosoma X (XCI) en pasajes bajos (Pasaje P1-5). Sin embargo, cuatro de las ocho líneas de HDF en números de pasaje altos (≥P10) mostraron rasgos distintivos duplicados de cromosoma X inactivo, incluyendo dos señales puntuadas de trimetilación de lisina 27 de histona H3 (H3K27me3) y señales de ARN de transcrito específico de X inactivo (XIST) en aproximadamente el 8,5-18,5% de las células. Nuestros datos sugieren que el número de copias de cromosomas X inactivos en un subconjunto de HDF femeninas se multiplica por dos. Consistentemente, la hibridación fluorescente in situ (FISH) de ADN identificó 3-4 copias de cromosomas X en un núcleo en este subconjunto de células con dos X inactivos. Llegamos a la conclusión de que los cultivos HDF femeninos presentan un mayor riesgo de anomalías genéticas tales como portar un mayor número de cromosomas X incluyendo tanto cromosomas X activos como inactivos en un paso alto (≥P10).

• Materias:Proliferación celular Biología celular Citogenética Movimiento celular Estrés oxidativo
• Subjects:Cell proliferation Cell biology Cytogenetics Cell movement Oxidative stress
• Palabras claves:cromosomas X inactivos, células, cromosomas X, fibroblastos dérmicos humanos femeninos, fibroblastos primarios humanos, inactivación del cromosoma X, cultivos HDF femeninos, números de pasaje elevados, histona H3 lisina, cromosoma X inactivo
• Keywords:inactive X chromosomes, cells, X chromosomes, female human dermal fibroblasts, Human primary fibroblasts, X chromosome inactivation, female HDF cultures, high passage numbers, histone H3 lysine, inactive X chromosome