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Performance Evaluation of Monolith Based Immobilized Acetylcholinesterase Flow-Through Reactor for Copper(II) Determination with Spectrophotometric DetectionEvaluación del rendimiento del reactor de flujo continuo de acetilcolinesterasa inmovilizada basado en monolito para la determinación de cobre(II) con detección espectrofotométrica

Resumen

Se ha desarrollado un reactor de flujo continuo basado en un monolito de acetilcolinesterasa (AChE) inmovilizada para la determinación de cobre(II) mediante un sistema espectrofotométrico de inyección en flujo. El biorreactor se preparó dentro de una columna microcapilar mediante la polimerización in situ de metacrilato de butilo, dimetacrilato de etileno y 2,2-dimetoxi-1,2-difinoletano-1-ona en presencia de 1-decanol, seguida de la funcionalización con azlactona de vinilo y la inmovilización de la AChE. El comportamiento de la AChE antes y después de ser inmovilizada en el monolito se evaluó mediante parámetros cinéticos de la ecuación de Lineweaver y Burk. La detección se basó en la medición del efecto de inhibición de la actividad enzimática de la AChE por el cobre(II) mediante la reacción de Ellman con detección espectrofotométrica a 410 nm. El rango lineal del gráfico de calibración se obtuvo en el intervalo de 0,02-3,00 mg L-1. El límite de detección, definido como el 10% de inhibición (I10), resultó ser de 0,04 mg L-1. La repetibilidad fue del 3,35% (n=5) para 1,00 mg L-1 de cobre(II). El método propuesto se aplicó a la determinación de cobre(II) en muestras de agua natural con una frecuencia de muestreo de 4 h-1.

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