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In Vitro Evaluation of a Biomedical-Grade Bilayer Chitosan Porous Skin Regenerating Template as a Potential Dermal Scaffold in Skin Tissue EngineeringEvaluación in vitro de una plantilla regeneradora cutánea porosa de quitosano de grado biomédico como posible andamio dérmico en ingeniería de tejidos cutáneos.

Resumen

El quitosano es un copolímero de N-acetilglucosamina y glucosamina. Se ha desarrollado una plantilla regeneradora cutánea porosa bicapa de quitosano (CPSRT) para la ingeniería de tejidos cutáneos. El tamaño de los poros de la CPSRT se evaluó mediante microscopía electrónica de barrido (SEM). La citocompatibilidad in vitro de la CPSRT se comprobó en cultivos primarios de queratinocitos epidérmicos humanos (pHEK) midiendo los niveles de lactato deshidrogenasa (LDH) y la irritación cutánea mediante análisis western blot de las secreciones de interleucina-8 (IL-8) y factor de necrosis tumoral-α (TNF-α). La capacidad de la CPSRT para favorecer el crecimiento celular se evaluó sembrando fibroblastos dérmicos humanos primarios (pHDF) en el andamio, tiñendo las células con tinción vivo/muerto y obteniendo imágenes de la construcción mediante microscopía confocal (CLSM). El CPSRT con tamaños de poro de 50 a 150 μm era citocompatible porque no provocaba la producción adicional de IL-8 y TNF-α por los cultivos de pHEK. Las pHDF cultivadas fueron capaces de penetrar la CPSRT y habían aumentado en número el día 14. En conclusión, la CPSRT sirve de plantilla ideal para la ingeniería de tejidos cutáneos.

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