Resumen

La evolución dirigida de proteínas es una técnica utilizada para modificar las funciones de las proteínas mediante "selección darwiniana". La compartimentación in vitro (IVC) es un sistema de selección de genes in vitro para la evolución dirigida de proteínas. La IVC establece el vínculo entre la información genética (genotipo) y la proteína traducida a partir de la información (fenotipo), que es esencial para todos los métodos de evolución dirigida, encapsulando ambos en un microcompartimento no vivo. Presentamos aquí un nuevo sistema IVC basado en liposomas que consiste en un liposoma, el sistema de síntesis de proteínas mediante elementos recombinantes (PURE) y un clasificador celular activado por fluorescencia (FACS) utilizados como microcompartimento, sistema de síntesis de proteínas in vitro y criba de alto rendimiento, respectivamente. La CIV basada en liposomas se caracteriza por la síntesis in vitro de proteínas a partir de una única copia de un gen en un liposoma unilamelar de tamaño celular y la evaluación funcional cuantitativa de las proteínas sintetizadas. Se describen ejemplos de CIV basada en liposomas para el cribado de proteínas como la GFP y la β-glucuronidasa. Se discuten las direcciones futuras de este método y sus aplicaciones.

• Materias:Genética molecular Ácido ribonucleico (ARN) Genómica Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos
• Subjects:Molecular genetics Ribonucleic acid (RNA) Genomics Polymerase chain reaction Nucleic acids
• Palabras claves:ivc, proteínas, síntesis de proteínas, sistema de cribado de genes, sistema de síntesis de proteínas, evaluación funcional cuantitativa, liposoma unilamelar de tamaño, evolución, liposoma, microcompartimento
• Keywords:ivc, proteins, protein synthesis, gene screening system, protein synthesis system, quantitative functional evaluation, sized unilamellar liposome, evolution, liposome, microcompartment