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Expression of Recombinant Human Alpha-Lactalbumin in the Milk of Transgenic Goats Using a Hybrid Pomoter/EnhancerExpresión de alfa-lactoalbúmina humana recombinante en la leche de cabras transgénicas mediante un pomoter híbrido/ potenciador

Resumen

Para mejorar el contenido en nutrientes de la leche de cabra, describimos la construcción de un vector (pBLAC) que contiene un promotor híbrido de β-lactoglobulina caprina (BLG) y potenciador de citomegalovirus (CMV). También describimos la generación de cabras transgénicas que expresan rhLA mediante transferencia nuclear de células somáticas (TNCS). De 334 embriones en estadio unicelular derivados de tres líneas celulares transgénicas y 99 embriones derivados de células no transgénicas (NT) transferidos quirúrgicamente a los oviductos de 37 receptoras, dos receptoras parieron dos cabritos (2%) de la línea no transfectada y cinco receptoras parieron seis cabritos (1,8%) de las líneas celulares transgénicas, tres de los cuales murieron a los dos días. En comparación con las células donantes NT, la transfección de las células donantes no afecta negativamente al desarrollo de embriones de transferencia nuclear en descendencia transgénica viable. Sin embargo, la eficiencia de clonación en la línea celular número 1 fue inferior a la de los números 2 y 3, y a la de las líneas NT (0,9% frente a 1,9,4 y 2%; P < 0,05 ). Dos cabras clonadas transgénicas expresaron rhLA en la leche a 0,1-0,9 mg/mL. El vector de expresión específico de la glándula mamaria pBLAC con el híbrido BLG/CMV puede conducir al gen hLA a expresarse in vitro e in vivo. Estos datos sientan las bases para el uso de una estrategia híbrida de promotor/reforzador para producir cabras transgénicas rhLA.

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