Resumen

Se clonó un gen de xilanasa xynAMG1 con un marco de lectura abierto de 1.116 pb, que codifica una endo-β-1,4-xilanasa, a partir de un metagenoma de ciego de pollo. La proteína XynAMG1 traducida constaba de 372 aminoácidos, incluido un péptido señal putativo de 23 aminoácidos. La masa molecular calculada de la XynAMG1 madura era de 40.013 Da, con un valor pI teórico de 5,76. La secuencia de aminoácidos de XynAMG1 mostró un 59% de identidad con la endo-β-1,4-xilanasa de Prevotella bryantii y Prevotella ruminicola y un 58% de identidad con la de Prevotella copri. XynAMG1 tiene dos motivos conservados, DVVNE y TEXD, que contienen dos glutamatos en el sitio activo y una asparagina invariante, característicos de la xilanasa de la familia GH10. El gen xynAMG1 sin la secuencia del péptido señal se clonó y fusionó con la proteína tiorredoxina (Trx.Tag) en el plásmido pET-32a y se sobreexpresó en Escherichia coli Tuner™(DE3)pLysS. La XynAMG1 madura purificada fue altamente tolerante a la sal y estable y mostró más del 96% de su actividad catalítica en la reacción que contenía de 1 a 4 M de NaCl. Sólo se vio ligeramente afectada por disolventes orgánicos comunes añadidos en solución acuosa hasta 5 M. Esta xilanasa derivada del metagenoma del ciego de pollo tiene aplicaciones potenciales en aditivos para piensos y procesos enzimáticos industriales que requieran la exposición a altas concentraciones de sal y disolventes orgánicos.

• Materias:Microbiología Bacteriología Biología molecular Propiedades farmacológicas Infectología
• Subjects:Microbiology Bacteriology Molecular biology Pharmacological Properties Infectious disease medicine
• Palabras claves:Metagenoma del ciego de pollo, xilanasa, aminoácidos, Escherichia coli Tuner™, xilanasa de la familia GH10, glutamatos del sitio activo, secuencia de aminoácidos, aditivos para piensos, masa molecular calculada, disolventes orgánicos comunes.
• Keywords:chicken cecum metagenome, xylanase, amino acids, Escherichia coli Tuner™, GH10 family xylanase, active site glutamates, amino acid sequence, animal feed additives, calculated molecular mass, common organic solvents