Resumen

La subfamilia Ras es miembro de la superfamilia de pequeñas proteínas G implicadas en la transducción de señales celulares. La activación de la señalización Ras provoca el crecimiento, la diferenciación y la supervivencia de las células. La proteína Bombyx mori Ras-like (BmRas1) puede pertenecer a la subfamilia Ras. Contiene un dominio H-N-K-Ras-like. El ARNm de la BmRas1 constaba de 1459 pb. El marco de lectura abierto contenía 579 pb y codificaba 192 aminoácidos. La proteína tenía estructuras secundarias como α-hélices, cadena extendida y espiral aleatoria. BmRas1 se expresó con éxito en E. coli BL21. La proteína recombinante se purificó mediante cromatografía de afinidad con quelantes metálicos. La actividad GTPasa de la proteína purificada se determinó mediante el ensayo FeSO4-(NH4)2MoO4. Los resultados mostraron que la proteína recombinante purificada tenía actividad intrínseca de GTPasa. Se generaron anticuerpos policlonales de alto título mediante inmunización de conejos de Nueva Zelanda con la proteína purificada. Las características de expresión génica de BmRas1 en diferentes estadios y en diferentes órganos de las larvas de quinto estadio se analizaron mediante Western blot. Los resultados mostraron que BmRas1 se expresaba altamente en tres estadios de desarrollo incluyendo huevo, pupa y adulto, pero baja expresión en larva. BmRas1 se expresaba en los tejidos de la cabeza, el túbulo de Malpigh, la glándula genital y la glándula de la seda. La proteína recombinante purificada se utilizará para realizar nuevos estudios sobre la función de BmRas1.

• Materias:Ácido ribonucleico (ARN) Genes mitocondriales Genómica Proteómica Epigenómica
• Subjects:Ribonucleic acid (RNA) Mitochondrial genes Genomics Proteomics Epigenomics
• Palabras claves:BmRas1, proteína, subfamilia Ras, proteína recombinante, superfamilia de proteínas G pequeñas, Bombyx mori Ras, E. coli BL21, conejo de Nueva Zelanda, transducción celular de señales, larvas de quinto estadio
• Keywords:BmRas1, protein, Ras subfamily, recombinant protein, small G proteins superfamily, Bombyx mori Ras, E. coli BL21, New Zealand rabbit, cellular signal transduction, fifth instar larvae