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Expression, Purification, and Characterization of (R)-Sulfolactate Dehydrogenase (ComC) from the Rumen Methanogen Methanobrevibacter millerae SM9Expresión, purificación y caracterización de la (R)-sulfolactato deshidrogenasa (ComC) del metanógeno ruminal Methanobrevibacter millerae SM9

Resumen

La (R)-sulfolactato deshidrogenasa (EC 1.1.1.337), denominada ComC, es un miembro de la familia de enzimas oxidorreductasas dependientes de NADH/NADPH que catalizan la interconversión de 2-hidroxiácidos en sus correspondientes 2-oxoácidos. La reacción ComC es reversible y en la dirección biosintética provoca la conversión de (R)-sulfolactato a sulfopiruvato en la producción de coenzima M (ácido 2-mercaptoetanosulfónico). La coenzima M es un cofactor esencial requerido para la producción de metano por el complejo metil-coenzima M reductasa. La ComC cataliza el tercer paso de la primera vía biosintética establecida de la coenzima M y también está implicada en la biosíntesis de la metanopterina. En este estudio, la ComC de Methanobrevibacter millerae SM9 fue clonada y expresada en Escherichia coli y caracterizada bioquímicamente. El sulfopiruvato fue el sustrato preferido para la reacción de reducción, con 31 ctividad observada para el oxaloacetato y un 0,2% para el α-cetoglutarato. La actividad óptima se observó a pH 6,5. El KM aparente para el coenzima (NADH) fue de 55,1 μM, y para el sulfopiruvato, fue de 196 μM (para el sulfopiruvato el Vmax fue de 93,9 μmol min-1 mg-1 y el kcat fue de 62,8 s-1). El papel crítico de ComC en dos vías cofactoriales separadas hace que esta enzima sea un medio potencial para desarrollar inhibidores específicos de metanógenos para controlar las emisiones de metano de los rumiantes, que cada vez se reconoce más que contribuyen al cambio climático.

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Información del documento

  • Titulo:Expression, Purification, and Characterization of (R)-Sulfolactate Dehydrogenase (ComC) from the Rumen Methanogen Methanobrevibacter millerae SM9
  • Autor:Yanli, Zhang; Linley R., Schofield; Carrie, Sang; Debjit, Dey; Ron S., Ronimus
  • Tipo:Artículos
  • Año:2017
  • Idioma:Inglés
  • Editor:Hindawi
  • Materias:Dióxido de carbono Genes Metabolismo (Bioquimica) Arqueas metanogénico
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