Resumen

Las proteínas de superficie de las esporas de microsporidios son un aspecto importante y poco investigado de la adhesión e infección entre esporas y células huésped. Para el análisis comparativo de las proteínas de superficie, necesitábamos un anticuerpo de control específico para una proteína intracelular. Se eligió un miembro de la familia de la proteína 70 de choque térmico asociada al retículo endoplásmico (Hsp70; ECU02_0100; "C1") para su posterior análisis. Se amplificó el ADN que codifica la hsp70 C1, se clonó y se utilizó para expresar heterológicamente la proteína Hsp70 C1, y se generó un antisuero específico. El análisis Western blot bidimensional mostró que los anticuerpos purificados eran monoespecíficos. La microscopía inmunoelectrónica de esporas en desarrollo y maduras de E. cuniculi reveló que la proteína se localizaba en estructuras internas y no en la superficie de la espora. En los ensayos de inhibición de la adherencia de las esporas, los anticuerpos anti-C1 no inhibieron la adherencia de las esporas a la superficie de las células huésped, mientras que los anticuerpos contra una adhesina de superficie conocida (EnP1) sí lo hicieron. En futuros estudios, los anticuerpos contra la Hsp70 "C1" se utilizarán para delinear la expresión de proteínas de superficie de las esporas.

• Materias:Microbiología Bacteriología Genética microbiana Virología Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
• Subjects:Microbiology Bacteriology Microbial genetics Virology Polymerase chain reaction
• Palabras claves:análisis Western blotting dimensional, esporas maduras de E. cuniculi, ensayos de inhibición de la adherencia de esporas, expresión de proteínas de superficie de esporas, proteína C1 Hsp70, proteína de choque térmico, adhesión de células huésped, superficies de células huésped, proteínas de superficie de esporas, Hsp70
• Keywords:dimensional Western blotting analysis, mature E. cuniculi spores, spore adherence inhibition assays, spore surface protein expression, C1 Hsp70 protein, heat shock protein, host cell attachment, host cell surfaces, spore surface proteins, Hsp70