La formación del híbrido ARN-ADN, o bucle R, se estudió in vitro transcribiendo una repetición AGGAG con la ARN polimerasa T7. Cuando la ribonucleasa T1 estaba presente, la formación del bucle R en cis disminuía, lo que indicaba que el transcrito se separaba de la plantilla y se reasociaba con ella. Se observó que el transcrito formaba un bucle R en trans con el ADN que contenía la repetición AGGAG, cuando el ADN estaba superenrollado. Los resultados de la modificación química indicaron que el dúplex se abría en la repetición AGGAG bajo superenrollamiento negativo.
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