Resumen

El virus de la necrosis nerviosa (nodavirus) ha sido responsable de mortalidades masivas en la industria acuícola de todo el mundo, con un gran impacto económico y medioambiental. Una prueba rápida y de bajo coste para identificar el genotipo del nodavirus podría tener importantes beneficios para las aplicaciones de vacunas y diagnóstico en laboratorios de pequeña y mediana escala, tanto en el mundo académico como en la industria de la piscicultura. Se desarrolló y optimizó un biosensor de flujo lateral dual para la detección simultánea de los genotipos de nodavirus más prevalentes (RGNNV y SJNNV). El biosensor dual consistía en dos zonas de prueba basadas en anticuerpos, indicativas de cada genotipo, y una zona de control. Las señales positivas se visualizaron mediante nanopartículas de oro funcionalizadas con anticuerpos antibiotina, y la detección se completó en 20 min. Los estudios de optimización incluyeron la determinación del tipo y la cantidad de anticuerpo para la construcción de la zona de prueba, la selección del tipo de conjugado de nanopartículas de oro para la generación de señales elevadas y la determinación de los parámetros del ensayo de detección. Tras la optimización, el biosensor se evaluó con muestras de peces sanos e infectados por el nodavirus RGNNV. El coste del ensayo propuesto se estimó en menos de 3 euros, incluyendo los reactivos y el biosensor necesarios. Este trabajo presenta pasos importantes hacia la fabricación de un biosensor de flujo lateral dual para el genotipado de nodavirus; se necesita una evaluación adicional con muestras clínicas antes de que la prueba sea apropiada para el desarrollo de kits de diagnóstico.

• Materias:Análisis cromatográfico Química farmacéutica Estructura molecular Análisis químico Análisis espectroquímico
• Subjects:Chromatographic analysis Chemistry pharmaceutical Molecular structure Chemical test Spectrochemical analysis
• Palabras claves:biosensor dual de flujo lateral, determinación de parámetros de ensayo de detección, selección del tipo de conjugado de nanopartículas de oro, virus de la necrosis nerviosa, desarrollo de kits de diagnóstico, industria piscícola, generación de señales elevadas, genotipos prevalentes de nodavirus, construcción de zonas de prueba, rgnnv
• Keywords:dual lateral flow biosensor, detection assay parameter determination, gold nanoparticle conjugate type selection, nervous necrosis virus, diagnostic kit development, fish farming industry, high signal generation, prevalent nodavirus genotypes, test zone construction, rgnnv