Se desarrolló un método simple de HPLC de fase reversa para medir los niveles hepáticos de aducto de proteína acetaminofén (APAP) después de una sobredosis de APAP. Se colocó un alícuota de homogeneizado de hígado en solución salina tamponada con fosfato a pH 7.4 (PBS) en un dispositivo centrífugo Nanosep, que se centrifugó para obtener un residuo de proteína. Este residuo se incubó con una solución de ácido -aminobenzoico (PABA), el estándar interno, y proteasa bacteriana en PBS, se transfirió a un dispositivo centrífugo Nanosep y se centrifugó. Una porción de 100L del filtrado se analizó en una columna YMC-Pack ODS-AMQ C18, utilizando fosfato dihidrogenado de potasio-metanol-ácido acético (100:0.6:0.1) como fase móvil, una velocidad de flujo de 1mL/min y detección fotométrica a 254nm.
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