Resumen

El humor acuoso (AH) es un líquido transparente que llena las cámaras anterior y posterior del ojo. Aporta nutrientes y elimina los residuos metabólicos de los tejidos avasculares del ojo. La correcta homeostasis del AH es necesaria para mantener una presión intraocular adecuada, así como las propiedades ópticas y refractivas del ojo. La aplicación de la metabolómica al estudio de la AH humana puede mejorar el conocimiento de los mecanismos moleculares de las enfermedades oculares. Hasta ahora, el análisis global de metabolitos en la HTA se ha realizado principalmente mediante RMN. Entre las plataformas analíticas utilizadas en metabolómica, la LC-MS es la que permite una mayor cobertura del metaboloma. El objetivo de este estudio era desarrollar un método de extracción y análisis de metabolitos del AH mediante LC-QTOF-MS. Se probaron diferentes protocolos para la preparación del AH. Los mejores resultados se obtuvieron mezclando un volumen de AH con un volumen de metanol : etanol (1 : 1). En el método final, se analizaron 2 µl de muestra extraída mediante LC-QTOF-MS. El método permitió la medición reproducible de más de 1000 características metabólicas. Se identificaron casi 250 metabolitos en AH y se asignaron a 47 rutas metabólicas. Este método es adecuado para estudiar el papel potencial de los aminoácidos, los lípidos, el estrés oxidativo o los metabolitos microbianos en el desarrollo de enfermedades oculares.

• Materias:Reacciones químicas Análisis cromatográfico Farmacología Análisis químico Análisis espectroquímico
• Subjects:Chemical reactions Chromatographic analysis Pharmacology Chemical test Spectrochemical analysis
• Palabras claves:ojo, método, presión intraocular adecuada, mayor cobertura del metaboloma, qtof, metabolitos, metabolómica, volumen, metabolitos ah, preparación ah
• Keywords:eye, method, adequate intraocular pressure, highest metabolome coverage, qtof, metabolites, metabolomics, volume, ah metabolites, ah preparation