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Identification of Multiple Soluble Fe(III) Reductases in Gram-Positive Thermophilic Bacterium Thermoanaerobacter indiensis BSB-33Identificación de múltiples Fe(III) reductasas solubles en la bacteria termófila grampositiva Thermoanaerobacter indiensis BSB-33

Resumen

Se ha demostrado anteriormente que Thermoanaerobacter indiensis BSB-33 reduce el Fe(III) y el Cr(VI) anaeróbicamente a 60°C de forma óptima. Además, la bacteria termófila Gram-positiva contiene actividad reductora de Cr(VI) tanto en la membrana como en el citoplasma. Se observó que la fracción soluble preparada a partir de células de T. indiensis cultivadas a 60°C contenía la mayor parte de la actividad reductora de Fe(III) del microorganismo y producía cuatro bandas distintas en el gel no desnaturalizante de actividad Fe(III) reductasa. Las proteínas de cada una de estas bandas se purificaron parcialmente por cromatografía y se identificaron por espectrometría de masas (EM) con ayuda de las secuencias del proteoma de T. indiensis. Se determinó que dos dihidrolipoamida deshidrogenasas (LPD) paralogas, la tiorredoxina reductasa (Trx), la NADP(H)-nitrito reductasa (Ntr) y la tiorredoxina disulfuro reductasa (Tdr) eran responsables de la actividad Fe(III) reductasa. Se realizaron análisis de la secuencia de aminoácidos y de la similitud estructural tridimensional (3D) de las Fe(III) reductasas de T. indiensis con proteínas reductoras de Cr(VI) de otras bacterias. Las dos LPD y la Tdr mostraron una identidad de secuencia y estructural muy significativa, respectivamente, con la dihidrolipoamida deshidrogenasa reductora de Cr(VI) de Thermus scotoductus y la tiorredoxina disulfuro reductasa de Desulfovibrio desulfuricans. Parece que, además de su actividad reductora del hierro, las LPD y Tdr de T. indiensis posiblemente también participan en la reducción del Cr(VI).

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