Resumen

Se ha desarrollado un sencillo sistema de ensayo inmunoenzimático dot blot utilizando un tejido de poliéster recubierto con un aptámero de ADN-oligo que proporciona una superficie macroporosa de alta afinidad para la captura eficaz de un analito proteico modelo (trombina) en matrices de muestras complejas como los alimentos. La trombina ligada se detectó inmunoenzimáticamente utilizando un anticuerpo antitrombina ligado a peroxidasa y un sustrato cromogénico. Una característica única de este método, que hemos denominado "aptablot", es la fácil inmovilización de los aptámeros de ADN en la superficie de poliéster mediante reticulación con una breve exposición a la luz ultravioleta, y el sencillo formato del ensayo que evita la necesidad de instrumentos especializados. El principio de ensayo aquí descrito debería ser ampliamente aplicable a muchas situaciones en las que deben detectarse analitos en muestras complejas, siendo el principal factor limitante la disponibilidad de aptámeros de ADN adecuados.

• Materias:Genética Molecular Ácido ribonucleico (ARN) Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Daño del ADN Mutación genética
• Subjects:Molecular Genetic Ribonucleic acid (RNA) Polymerase chain reaction DNA Damage Genetic mutation
• Palabras claves:matrices de muestras complejas, sistema de ensayo inmunoenzimático, analito proteico modelo, formato de ensayo sencillo, dot blot sencillo, aptámeros de adn adecuados, trombina, aptámero de adn, aptámeros de adn, anticuerpo antitrombina
• Keywords:complex sample matrices, immunoenzymatic assay system, model protein analyte, simple assay format, simple dot blot, suitable dna aptamers, thrombin, dna aptamer, dna aptamers, antithrombin antibody