Resumen

Se desarrolló un inmunosensor altamente sensible basado en un chip nanopatternado de oro para la determinación precisa de la alfa-fetoproteína (AFP) mediante microscopía de fluorescencia de refección interna total (TIRFM). La superficie de los chips de nanopatrones de oro se modificó con ditiobis(succinimidil propionato) y proteína A/G para la inmovilización del anticuerpo de AFP. El inmunoensayo creó un sándwich de antígeno entre el anticuerpo de AFP en el chip modificado con proteína A/G y el anticuerpo secundario, un anti-AFP humano monoclonal marcado con biotina (anti-AFP marcado con biotina). La concentración de AFP se determinó basándose en la señal de fluorescencia de campo evanescente, generada por la interacción entre el anti-AFP marcado con biotina y un colorante fluorescente marcado con estreptavidina. La concentración de AFP pudo medirse en un amplio rango dinámico lineal de 720 zM-10 nM con un límite de detección de 720 zM. Con el chip AFP-nanoarray se consiguió una sensibilidad significativamente mayor (~40.000 veces) que con los inmunosensores de quimioluminiscencia convencionales. El inmunoensayo exhibió un amplio rango de detección y una alta sensibilidad y precisión, cualidades valiosas para el ensayo clínico de AFP.

• Materias:Biotecnología Análisis electroquímico Nanotecnología Nanopartículas Nanotubos
• Subjects:Biotechnology Electrochemical analysis Nanotechnology Nanoparticles Nanotubes
• Palabras claves:afp, biotina, anticuerpo afp, concentración afp, proteína a, señal de fluorescencia de campo evanescente, microscopía de fluorescencia de refección interna total, amplio rango dinámico lineal, inmunosensores de quimioluminiscencia convencionales, amplio rango de detección
• Keywords:afp, biotin, afp antibody, afp concentration, protein a, evanescent field fluorescence signal, total internal refection fluorescence microscopy, wide dynamic linear range, conventional chemiluminescence immunosensors, wide detection range