Resumen

Para aclarar la interacción nanopartícula-proteína y sus características de acción, se estudiaron las interacciones entre las NPs MTO-CHP y la albúmina sérica humana (HSA) mediante calorimetría de valoración isotérmica (ITC), espectroscopia de fluorescencia, dispersión dinámica de la luz (DLS) y espectroscopia de dicroísmo circular (CD). Se prepararon nanopartículas (NPs) de pullulano modificado hidrofóbicamente (CHP) cargadas con mitoxantrona (MTO) (MTO-CHP NPs) con un tamaño de 166,9 nm. La forma esférica se verificó mediante microscopía electrónica de transmisión (MET). Los resultados del ITC demostraron una interacción entre las NPs MTO-CHP principalmente por fuerza de interacción hidrofóbica, fuerza electrostática y enlace de hidrógeno. La constante de enlace media KA fue de 0,832×104 M-1 y la cobertura media HSA de 0,939±0,302. Las NPs MTO-CHP pudieron apagar la intensidad de fluorescencia de la HSA, que disminuyó gradualmente hasta equilibrarse en 9 h e indicó la finalización de la complejación. Los cambios de tamaño y potencial zeta de la partícula combinada se detectaron dinámicamente con DLS a las 0, 3, 6, 9, 12, 15 y 18 h. Cuando la reacción se completó a las 9 h, el tamaño y el potencial de la partícula permanecieron estables, acompañados de un cambio de tamaño de 89,91 a unos 145 nm y de un cambio de potencial de -15 a -3 mV, respectivamente. Los resultados de la medición de CD mostraron que el cambio de elipticidad de la HSA a 208 nm era similar al de los espectros de fluorescencia y las mediciones DLS con las NPs MTO-CHP combinadas con HSA. Al principio de la reacción, la proporción de α-hélice era del 52,3% al 43,7%, que disminuyó en un 39,1 t estabilización del compuesto. La liberación de MTO a partir de las NPs MTO-CHP a pH=5,6 se aceleró significativamente, mientras que la de MTO a partir de las NPs HSA-MTO-CHP se redujo significativamente, y la liberación del fármaco se ralentizó significativamente incluso en condiciones ácidas, lo que indica el efecto beneficioso de la HSA sobre la persistencia y estabilidad del compuesto HSA-MTO-CHP NP.

• Materias:Biotecnología Análisis electroquímico Bioingeniería Nanocompuestos Nanotubos
• Subjects:Biotechnology Electrochemical analysis Bioengineering Nanocomposites Nanotubes
• Palabras claves:mto, chp nps, hsa, compuesto chp np, cobertura hsa 0,939±0,302, espectroscopia de dicroísmo circular, albúmina sérica humana, fuerza de interacción hidrofóbica, calorimetría de titulación isotérmica, microscopía electrónica de transmisión.
• Keywords:mto, chp nps, hsa, chp np compound, hsa coverage 0.939±0.302, circular dichroism spectroscopy, human serum albumin, hydrophobic interaction force, isothermal titration calorimetry, transmission electron microscopy