Resumen

La serina proteasa trombina activa los receptores activados por proteasas (PAR), una familia de receptores acoplados a proteínas G (GPCR) que se activan mediante la escisión proteolítica de su dominio N-terminal extracelular. Se han identificado cuatro miembros de esta familia: PAR1-4. La activación del receptor activado por proteasa 1 (PAR1), el prototipo de esta familia de receptores, conduce a un aumento de la concentración de Ca 2 intracelular ([Ca 2]i) mediado por el acoplamiento Gq11α y la activación de la fosfolipasa C (PLC). Anteriormente hemos demostrado que la estimulación de PAR1 por trombina promueve la señalización intracelular que conduce a la transformación, proliferación y migración de las células del EPR que caracterizan las enfermedades oculares fibroproliferativas que conducen a la ceguera. En este contexto, la elucidación de los mecanismos implicados en la inactivación de PAR1 es de suma importancia. Debido a la naturaleza irreversible de la activación de PAR1, su inactivación debe ser regulada eficientemente para terminar la señalización. Utilizando la línea celular ARPE-19 del EPR humano, caracterizamos el aumento de [Ca 2]i inducido por trombina y demostramos la activación dependiente de calcio de μ-calpaína mediada por PAR1. Las calpaínas son una familia de proteasas de cisteína activadas por calcio que intervienen en múltiples procesos celulares, incluida la internalización de proteínas de membrana a través de vesículas recubiertas de clatrina. Hemos demostrado que la activación de calpaína inducida por PAR1 resulta en la degradación de α-espectrina por calpaína, esencial para la endocitosis del receptor, y la consecuente disminución de la expresión de membrana de PAR1. En conjunto, los presentes resultados identifican un nuevo mecanismo dependiente de μ-calpaína para la inactivación de PAR1 tras la exposición a trombina.

• Materias:Biología molecular Ciclo celular Biología celular Receptor celular
• Subjects:Molecular biology Cell cycle Cell biology Cellular receiver
• Palabras claves:PAR1, calpaína, familia, trombina, inactivación de PAR1, línea celular humana ARPE-19 del EPR, expresión de PAR1 en membrana, transformación de células del EPR, resultados de la activación de calpaína, enfermedades oculares fibroproliferativas
• Keywords:PAR1, calpain, family, thrombin, PAR1 inactivation, ARPE-19 human RPE cell line, PAR1 membrane expression, RPE cell transformation, calpain activation results, fibroproliferative eye diseases