Resumen

UvrD es una helicasa de ADN que participa en la reparación por escisión de nucleótidos y en varios procesos asociados a la replicación, como la reparación de desajustes dirigida por metilo y la recombinación. UvrD es capaz de desplazar oligonucleótidos de estructuras sintéticas de ADN en horquilla in vitro y es esencial para la viabilidad en ausencia de Rep, una helicasa asociada al procesamiento de las horquillas de replicación. Estas observaciones han llevado a otros a proponer que UvrD puede promover la regresión de la horquilla y facilitar el restablecimiento de la horquilla de replicación tras la detención. Sin embargo, la actividad molecular de UvrD en las horquillas de replicación in vivo no se ha examinado directamente. En este estudio, hemos caracterizado el papel de UvrD en el procesamiento y restablecimiento de las horquillas de replicación tras la detención por daño en el ADN inducido por UV. Demostramos que UvrD es necesario para que se recupere la síntesis de ADN. Sin embargo, en ausencia de UvrD, el desplazamiento y la degradación parcial del ADN naciente en la horquilla detenida se producen con normalidad. Además, los intermediarios de replicación inducidos por el daño persisten y se acumulan en los mutantes uvrD de forma similar a la observada en otros mutantes de reparación por escisión de nucleótidos. Estos datos indican que, tras la detención por daño en el ADN, UvrD no es necesario para catalizar la regresión de la horquilla in vivo y sugieren que el fracaso de los mutantes uvrD para restaurar la síntesis de ADN después de la detención inducida por UV se relaciona con su papel en la reparación por escisión de nucleótidos.

• Materias:Genética molecular Ácido ribonucleico (ARN) Genómica Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos
• Subjects:Molecular genetics Ribonucleic acid (RNA) Genomics Polymerase chain reaction Nucleic acids
• Palabras claves:uvrd, reparación por escisión de nucleótidos, detención, daño de adn, síntesis de adn, regresión de horquilla, horquillas de replicación, mutantes uvrd, otros mutantes de reparación por escisión de nucleótidos, procesamiento de horquillas de replicación
• Keywords:uvrd, nucleotide excision repair, arrest, dna damage, dna synthesis, fork regression, replication forks, uvrd mutants, other nucleotide excision repair mutants, processing replication forks