Resumen

Las fluoroquinolonas (FQ) son antibióticos útiles en el tratamiento de la tuberculosis farmacorresistente, pero pueden seleccionarse rápidamente mutantes resistentes a las FQ. Aunque las mutaciones en la ADN girasa son la causa principal de esta resistencia, se ha descubierto que las proteínas pentapéptidas confieren una resistencia de bajo nivel a las FQ en bacterias Gram negativas. MfpA es una proteína de repetición pentapéptida conservada en los cromosomas micobacterianos, donde es adyacente a un grupo de cuatro genes altamente conservados denominado conservón. Queríamos caracterizar la regulación transcripcional del gen mfpA y relacionar su expresión con la resistencia a la ciprofloxacina en M. smegmatis. La PCR de transcripción inversa demostró que el gen mfpA forma parte de un operón que contiene los genes conservones. Utilizando una fusión transcripcional, demostramos que había un promotor situado 5′ del operón mfpEA. Determinamos la actividad del promotor en diferentes condiciones de crecimiento y encontramos que la expresión del operón aumenta ligeramente en fases tardías de crecimiento en pH básico y en concentraciones subinhibitorias de ciprofloxacino. Finalmente, clonando el gen mfpA en un vector inducible, demostramos que la expresión inducida de mfpA aumenta la Concentración Mínima Inhibitoria de ciprofloxacino. Estos resultados confirman que el aumento de la expresión del gen mfpA, que forma parte del operón mfpEA, aumenta la resistencia a la ciprofloxacina en M. smegmatis.

• Materias:Microbiología Bacteriología Propiedades farmacológicas Virología Biopelículas
• Subjects:Microbiology Bacteriology Pharmacological Properties Virology Biofilms
• Palabras claves:gen mfpA, expresión, M. smegmatis, resistencia a ciprofloxacino, operón mfpEA, concentración inhibitoria mínima de ciprofloxacino, diferentes condiciones de crecimiento, fases tardías de crecimiento, nivel de resistencia FQ, proteína pentapéptido repetida
• Keywords:mfpA gene, expression, M. smegmatis, ciprofloxacin resistance, mfpEA operon, ciprofloxacin Minimal Inhibitory Concentration, different growth conditions, late growth phases, level FQ resistance, pentapeptide repeat protein