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Nanomaterials Enhanced Gene Expression in Yeast CellsLos nanomateriales mejoran la expresión génica en células de levadura

Resumen

Se ha demostrado que los nanomateriales metálicos potencian la expresión del gen de la α-galactosidasa del arroz (α-Gal) en células de levadura. Se prepararon nanopartículas de Au y Ag y sus nanocompuestos, sílice-Au y sílice-Ag, y se caracterizaron mediante espectroscopia UV-vis y técnica TEM. El gen de la α-galactosidasa de arroz se clonó en el cromosoma de la levadura, donde las células clonadas se precultivaron e indujeron en un medio que contenía cada uno de los nanomateriales de ensayo. Se observó que los nanomateriales se incorporaban al interior de las células y no se detectó muerte celular durante el transcurso de la expresión del gen. La actividad enzimática se determinó mediante un sustrato sintético, p-nitrofenil-α-D-galctopiranósido, y el rendimiento del producto amarillo se registró en un espectrofotómetro a 400 nm. Cuando las nanopartículas de Au y Ag se incorporaron al cultivo, se observó un aumento de la α-galactosidasa de 3 a 5 veces tanto en la actividad intracelular como en la secretada al medio. Se analizó que la proteína secretada tenía una forma pura y se mostraba como una única banda proteica en la electroforesis SDS-gel. Se discuten los efectos del tamaño y la naturaleza química de los nanomateriales en la expresión del gen de la α-galactosidasa de arroz en células de levadura.

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