Resumen

Se necesitan materiales de referencia para cuantificar el nivel de daño del ADN en las células, evaluar las fuentes de variabilidad de las mediciones y comparar los resultados de distintos laboratorios. El ensayo cometa (electroforesis en gel unicelular) es un método ampliamente utilizado para determinar el daño del ADN en forma de roturas de hebra. Aquí examinamos el uso de la oxidación electroquímica para producir daños en el ADN en células de mamífero cultivadas y cuantificar su porcentaje mediante el ensayo cometa. Se cultivaron células de ovario de hámster chino (CHO) en una superficie de electrodo de óxido de indio y estaño y se expusieron 12 h a potenciales electroquímicos que oscilaban entre 0,5 V y 1,5 V (frente a Ag/AgCl). Las células resultantes se cosecharon y analizaron mediante un ensayo cometa y un ensayo de viabilidad celular. Se observó un aumento lineal del porcentaje (ADN en cola) de roturas de cadena junto con una pérdida de viabilidad celular con el aumento del valor del potencial de oxidación. Los resultados indican que se pueden producir daños en el ADN inducidos electroquímicamente en células de mamífero en condiciones bien controladas y que podrían tenerse en cuenta a la hora de elaborar un material de referencia celular para el ensayo cometa.

• Materias:Ingeniería genética Ácido desoxirribonucleico (ADN) Cultivo Celular Ácidos nucleicos Daño del ADN
• Subjects:Genetic engineering Deoxyribonucleic acid (DNA) Cell Culture Nucleic acids DNA Damage
• Palabras claves:daños en el adn, ensayo cometa, células, roturas de hebra, superficie del electrodo de óxido de indio y estaño, electroforesis en gel unicelular, ovario de hámster chino, ensayo de viabilidad celular, material de referencia celular, células de mamífero cultivadas
• Keywords:dna damage, comet assay, cells, strand breaks, indium tin oxide electrode surface, single cell gel electrophoresis, chinese hamster ovary, cell viability assay, cellular reference material, cultured mammalian cells