Resumen

La criopreservación de glóbulos rojos (GR) es muy importante para la medicina moderna. En la criopreservación de glóbulos rojos se han utilizado crioprotectores como el dimetilsulfóxido (DMSO), la prolina, la trehalosa y el alcohol polivinílico (PVA), pero los resultados no son satisfactorios. La proteína anticongelante Marinomonas primoryensis (MpAFP) es una AFP dependiente de Ca2 derivada de bacterias antárticas, que puede evitar que las bacterias se congelen en condiciones de frío extremo y puede ser adecuada para la criopreservación de glóbulos rojos. La región activa de MpAFP se encuentra en la región IV y se denomina MPAFP_RIV. En este trabajo, se introduce el gen de la región IV de MpAFP en células competentes BL21 (DE3) y se obtiene MpAFP_RIV tras su cultivo, separación y purificación. Se propone el ensayo splat mejorado, y este método demuestra por primera vez que MpAFP_RIV tiene una fuerte actividad de inhibición de la recristalización del hielo (IRI) sin Ca2 . El ensayo splat mejorado es más fácil de operar y menos costoso que el tradicional, y los resultados son consistentes con el ensayo clásico de sándwich de sacarosa, demostrando que este método puede detectar con precisión la actividad IRI. Se propone la viabilidad de la MPAFP_RIV combinada con la CPA clásica para la criopreservación de glóbulos rojos y los métodos para aumentar el rendimiento de la MPAFP_RIV.

• Materias:Análisis electroquímico Nanotecnología Nanoestructuras Nanocompuestos Nanotubos
• Subjects:Electrochemical analysis Nanotechnology Nanostructures Nanocomposites Nanotubes
• Palabras claves:ensayo splat mejorado, rbcs, crioconservación, región iv, proteína anticongelante marinomonas primoryensis, ensayo clásico de sándwich de sacarosa, fuerte inhibición de recristalización por hielo, glóbulos rojos, mpafp_riv, mpafp
• Keywords:improved splat assay, rbcs, cryopreservation, region iv, marinomonas primoryensis antifreeze protein, classic sucrose sandwich assay, strong ice recrystallization inhibition, red blood cells, mpafp_riv, mpafp