Resumen

Se han desarrollado procedimientos de inmovilización con invertasa utilizando diferentes soportes. Sin embargo, las desventajas como el uso de partículas pequeñas para inmovilizaciones de invertasa en reactores de lecho compacto se están resolviendo utilizando partículas magnéticas. En este estudio, los compuestos que contienen $F{e}_3{O}_4$​ se prepararon mediante la incorporaciónde una capa de polisiloxano necesaria para la adsorción física de la invertasa. Además, la magnetita funcionalizada se activó con glutaraldehído y polietilenimina (PEI) con el objetivo de realizar una inmovilización covalente. Se analizó el efecto de diferentes condiciones como la relación enzima: soporte, pH y temperatura en la conservación de la invertasa. Los resultados demostraron que la relación enzima: soporte óptima es mayor para la unión covalente que para la adsorción física. El pH ideal para la enzima inmovilizada es 5,0 y la actividad enzimática se mantiene hasta 70 ◦C. Los valores de$k_m$​ son similares en ambos métodos de inmovilización. El análisis del efecto del pH y la termoestabilidad mostró que la actividad catalítica de la invertasa no se ve afectada en comparación con la enzima libre. La inmovilización covalente muestra una mayor eficacia en el proceso de inmovilización (Fε),menos inhibición y el doble de estabilidad. Las enzimas inmovilizadas por métodos físicos y covalentes se pueden reutilizar hastapor cuatro ciclos y se pueden eliminar del medio de reacción aplicando un campo magnético externo.

1 INTRODUCCIÓN

El método enzimático es el más utilizado para obtener jarabe invertido con invertasa (EC.3.2.1.26) a partir de cepas de Saccharomyces cerevisiae 1. Sin embargo, la vida útil de la invertasa es corta y las especies bioactivas son inestables y menos selectivas. La inmovilización de la invertasa prolonga su vida útil, y la estabilidad de las especies bioactivas aumenta gracias a la protección del soporte. Estas características son útiles en biorreactores porque la separación de los productos es más fácil, y la recuperación enzimática es eficiente 2. Así, se han desarrollado diferentes formas de inmovilizar la invertasa. La invertasa se ha inmovilizado en soportes como microporos de montmorillonita 3, fibras compuestas de poliacrilonitrilo 4, poros de silicio funcionalizados 5, microesferas de nailon 6, nanopartículas de quitosano 7, alginato cálcico 8)(9 y superficies modificadas con polianilina 10, hidrogel compuesto de ácido metacrílico (MAAc) y Η-vinilpirrolidona (Η-VP) 11, entre otros.  Como resultado, estos estudios reportaron que la invertasa inmovilizada es más selectiva permitiendo la formación de bioproductos derivados de la ciclización de glucosa y fructosa con temperaturas que oscilan entre 30 y 40 °C.

• Materias:Partículas Enzimas Adsorción
• Subjects:Particles Enzymes Adsorption
• Palabras claves:invertasa, Fe3O4, inmovilización, compuestos
• Keywords:invertase, Fe3O4, immobilization, composites