Se desarrollaron conjugados de metotrexato y albúmina sérica humana mediante una sencilla reacción de carbodiimida. A continuación, los conjugados de metotrexato y albúmina sérica humana se reticularon con 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida HCl (EDC) para formar nanopartículas. El tamaño de las nanopartículas, determinado por dispersión de luz láser y TEM, se situó entre 90-150 nm. Las nanopartículas eran muy estables en condiciones fisiológicas (PBS pH 7,4, 37°C) y tras incubación con suero. Se examinó el efecto de la cantidad de EDC utilizada para el reticulante sobre el tamaño de las partículas y los grupos amino libres de las nanopartículas. La cantidad de reticulante no mostró ningún efecto significativo sobre el tamaño de las nanopartículas, pero los grupos amino libres de las nanopartículas disminuyeron al aumentar el reticulante. Las interacciones fisicoquímicas entre el metotrexato y la albúmina de suero humano se investigaron mediante calorimetría diferencial de barrido (DSC). Las nanopartículas resultaron más citotóxicas para las células T47D que el metotrexato libre. Además, las nanopartículas de metotrexato y albúmina sérica humana disminuyeron el valor IC50 del metotrexato en las células T47D en comparación con el metotrexato libre.
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