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Optimization of Human Corneal Endothelial Cells for Culture: The Removal of Corneal Stromal Fibroblast Contamination Using Magnetic Cell SeparationOptimización del cultivo de células endoteliales corneales humanas: La eliminación de la contaminación de los fibroblastos de la córnea mediante la separación celular magnética

Resumen

El cultivo de células endoteliales corneales (CEC) humanas es fundamental para el desarrollo de una alternativa de injerto adecuada en material biodegradable, específicamente para la queratoplastia endotelial, que puede aliviar potencialmente la escasez mundial de córneas de donantes de grado de trasplante disponibles. Sin embargo, la propagación de las CEC de proliferación lenta in vitro puede verse obstaculizada por los fibroblastos corneales estromales (FCE) de crecimiento rápido que pueden estar coisolados en algunos casos. El propósito de este estudio fue evaluar una estrategia que utiliza la técnica de separación celular magnética (MACS) para eliminar los LCR contaminantes de los cultivos de CEC utilizando microesferas magnéticas antifibroblastos. Las fracciones celulares separadas "etiquetadas" y "de flujo" se recogieron por separado, se cultivaron y se evaluaron morfológicamente. Las células de la fracción "flow-through" mostraban una morfología poligonal compacta y expresaban la ATPasa Na /K, indicativa de las células endoteliales de la córnea, mientras que las células de la fracción "etiquetada" eran en su mayoría alargadas y fibroblásticas. Se observó una eficacia de separación del 96,88%. Por lo tanto, la técnica MACS puede ser útil para eliminar las LCR contaminantes de un cultivo de CEC.

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