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An Optimized Real-Time PCR to Avoid Species-/Tissue-Associated Inhibition for H5N1 Detection in Ferret and Monkey TissuesUna PCR en tiempo real optimizada para evitar la inhibición asociada a especies/tejidos para la detección de H5N1 en tejidos de hurón y mono.

Resumen

La diagnóstica de PCR en tiempo real para el virus de la influenza aviar H5N1 en muestras de tejido a menudo es subóptima, ya que los inhibidores de PCR naturalmente presentes en las muestras, o la coincidencia inesperada de los cebadores con el genoma de una especie no secuenciada. Con el objetivo principal de optimizar el método de PCR en tiempo real con SYBR Green para detectar H5N1 en muestras de tejido de hurón y mono (macaco rhesus chino), examinamos varios pares de cebadores específicos del gen H5N1 y probamos su capacidad para detectar de manera sensible y específica los transcritos de H5N1 en los tejidos animales infectados, luego evaluamos el rendimiento y la calidad del ARN comparando los valores de Ct obtenidos del método estándar Trizol, y cuatro kits de aislamiento de ARN comúnmente utilizados con pequeñas modificaciones, incluyendo Roche High Pure, Ambion RNAqueous, BioMIGA EZgene y Qiagen RNeasy. Los resultados indicaron que

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  • Formato:pdf
  • Idioma:Inglés
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Información del documento

  • Titulo:An Optimized Real-Time PCR to Avoid Species-/Tissue-Associated Inhibition for H5N1 Detection in Ferret and Monkey Tissues
  • Autor:Zhan, LingJun; Bao, LinLin; Li, FengDi; Lv, Qi; Xu, LiLi; Qin, Chuan
  • Tipo:Artículo
  • Año:2012
  • Idioma:Inglés
  • Editor:The Scientific World Journal
  • Materias:Energías renovables Hidrocarburos Infección Enfermedades mentales Tumor
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