Resumen

La escalera de ADN se utiliza habitualmente para determinar el tamaño de fragmentos de ADN mediante electroforesis en laboratorios rutinarios de biología molecular. En este estudio, presentamos un nuevo procedimiento para preparar una escalera de ADN que consta de 10 fragmentos de 100 a 1000 pb. Este protocolo es una combinación de métodos empleados rutinariamente: clonación, PCR y digestión parcial con enzimas de restricción. Los fragmentos de ADN de 100 pb con un único sitio de restricción en ambos extremos se autoligaron para crear una repetición en tándem. Una vez clonada, la repetición en tándem se amplificó rápidamente mediante PCR y se digirió parcialmente con enzimas de restricción para producir una escalera que contenía multímeros de los fragmentos de ADN repetidos. Nuestro procedimiento para la producción de la escalera de ADN podría ser simple, ahorrar tiempo y ser barato en comparación con los actuales, ampliamente utilizados en la mayoría de los laboratorios.

• Materias:Genética molecular Ácido ribonucleico (ARN) Genómica Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos
• Subjects:Molecular genetics Ribonucleic acid (RNA) Genomics Polymerase chain reaction Nucleic acids
• Palabras claves:fragmentos de adn, escalera de adn, enzimas de restricción, repetición en tándem, rutina de los laboratorios de biología molecular, sitio único de restricción, pcr, actuales, mayoría de los laboratorios, nuevo procedimiento
• Keywords:dna fragments, dna ladder, restriction enzymes, tandem repeat, routine molecular biology laboratories, unique restriction site, pcr, current ones, most laboratories, new procedure