Resumen

Debido a que el papel desempeñado por las Proteínas de Choque Térmico (HSPs) en los procesos de inducción de inmunidad antitumoral, luego de su liberación por células tumorales, y su interacción con células dendríticas, son hasta el momento poco entendidos; es necesario generar herramientas útiles para el estudio de los aspectos relacionados con dichos procesos. Por consiguiente, en este trabajo, se propuso producir y purificar la proteína recombinante humana Hsc70 (rh-Hsc70) a partir de la cepa de E. coli BL21DE3pLysS pET28a(+)/Hsc70, con el fin de poder utilizarla en el estudio de su función biológica sobre un modelo in vitro de células dendríticas. De igual forma, se estableció un sistema por ELISA de detección y cuantificación de la Hsc70 cuando se encuentra en forma soluble.

INTRODUCCIÓN

Las proteínas de choque térmico (HSPs) son moléculas ubicuas que están presentes a lo largo de toda la escala evolutiva (Jolly y Morimoto, 2000). Estas proteínas a través de interacciones con porciones peptídicas llevan a cabo funciones vitales para la célula (Fourie et al, 1994). Bajo condiciones de estrés algunas de estas proteínas protegen a la célula de los efectos deletéreos ocasionados por incremento en temperatura, condiciones anóxicas, presencia de metales pesados entre otras (Schlesinger, 1990). La inmunogenicidad en algunos modelos tumorales se ha relacionado con la expresión y localización en la membrana celular de HSPs como la Hsp70 (proteína inducible por estrés) o la Hsc70 (proteína expresada de forma constitutiva) en células tumorales (Kishi, et al 2001; Multhoff, et al 1995a; 1995b; 1997; Tamura, et al 1993). Algunos trabajos han mostrado también, que la interacción de HSPs solubles con células dendríticas favorece la entrega de péptidos antigénicos derivados de tumor (Noessner et al, 2002; Todryk et al, 1999; Singh-Jausja et al, 2000), así como procesos de señalización que conducen a la maduración de estas células presentadoras de antígeno (Asea et al, 2002; Kuppner et al, 2001; Somersan et al , 2001; Todryk et al, 1999). Estas dos funciones mediadas por las proteínas HSPs solubles favorecen una apropiada inducción de linfocitos T efectores específicos de tumor (Todryk et al, 1999).

Recientemente, se ha descrito que algunos estímulos como el calor o la presencia de IFN-γ disminuyen la expresión en la membrana celular de la proteína Hsc70 en la línea tumoral K562 favoreciendo su liberación al entorno celular (Barreto et al, 2003).

• Materias:Proteínas Inmunología
• Subjects:Proteins Immunology
• Palabras claves:Estrés, HSP, Inmunidad, Recombinante, Tumor
• Keywords:HSP, Immunity, Recombinant, Stress, Tumor