Resumen

El hongo filamentoso Penicillium viridicatum RFC3 produjo pectato liasa (PL) en cultivos en estado sólido de una mezcla de bagazo de naranja y salvado de trigo (1 : 1 p/p), o bagazo de naranja, salvado de trigo y bagazo de caña de azúcar (1 : 1 : 0,5 p/p), y en un cultivo líquido sumergido con bagazo de naranja y salvado de trigo (3%) como fuente de carbono. La producción de PL fue mayor (1.500 U mL-1 o 300 Ug-1 de sustrato) en la fermentación en estado sólido (SSF) con salvado de trigo y bagazo de naranja a las 96 horas. La producción de PL en la fermentación sumergida (SmF) se vio influida por el pH inicial del medio. Con el pH inicial ajustado a 4,5, 5,0 y 5,5, el pico de actividad se observó tras 72, 48 y 24 horas de fermentación, respectivamente, cuando el pH del medio alcanzó el valor 5,0. Los PL de SSF y SmF se cargaron en columnas Sephadex-G75 y se obtuvieron seis picos de actividad de la enzima cruda de SSF y se designaron como PL I, II, III, IV, V y VI, mientras que de la enzima cruda de SmF se obtuvieron cinco picos y se etiquetaron como PL I′, II′, III′, IV′ y VII′. La enzima cruda y la fracción III de cada proceso fermentativo se sometieron a más pruebas. El pH óptimo para el PL crudo de cualquiera de los procesos fue de 5,5, mientras que el del PL III fue de 8,0. La actividad máxima de las enzimas procedentes de SSF se observó a 35∘C, pero la enzima cruda fue más termotolerante que la PL III, manteniendo su actividad máxima hasta 45∘C. La enzima bruta de SmF y PL III′ mostró perfiles termófilos de actividad, con actividad máxima a 60 y 55∘C, respectivamente. En ausencia de sustrato, la enzima cruda de SSF fue estable en el intervalo de pH 3,0-10,0 y PL III fue más estable en el intervalo de pH 4,0-7,0. La enzima bruta de la SmF conservó entre el 70% y el 80% de su actividad máxima en el intervalo de pH ácido-neutro (4,0-7,0), pero la PIII mostró una gran estabilidad a pH alcalino (7,5-9,5). El PL de SSF fue más termolábil que el de SmF. Esta última mantuvo el 60% de su actividad inicial tras 1 h a 55∘C. El diferente comportamiento de las enzimas con respecto al pH y la temperatura sugiere que se trata de isozimas diferentes.

• Materias:Microbiología Bacteriología Genética microbiana Virología Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
• Subjects:Microbiology Bacteriology Microbial genetics Virology Polymerase chain reaction
• Palabras claves:SSF, enzima bruta, actividad máxima, bagazo de naranja, salvado de trigo, SmF, PL III, enzima bruta, producción de PL, pH inicial.
• Keywords:SSF, crude enzyme, maximum activity, orange bagasse, wheat bran, SmF, PL III, Crude enzyme, PL production, initial pH