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Purification, Characterization, and Biocatalytic and Antibiofilm Activity of a Novel Dextranase from Talaromyces sp.Purificación, caracterización y actividad biocatalítica y antibiopelícula de una nueva dextranasa de Talaromyces sp.

Resumen

La dextranasa es una enzima útil que cataliza la degradación del dextrano a fracciones de bajo peso molecular, que tienen muchas aplicaciones comerciales y clínicas críticas. Los hongos endofíticos representan una fuente de enzimas termoestables y estables al pH. En este estudio, a partir de corteza de Delonix regia mediante ensayo en placa, de 12 cepas fúngicas aisladas, sólo se detectaron zonas hialinas en una cepa. Utilizando el análisis estándar de secuenciación del ADNr ITS, la cepa aislada se identificó como Talaromyces sp. En el caso de la fuente de carbono, en un medio que contenía 1 extran T2000 como única fuente de carbono, la actividad máxima de la dextranasa alcanzó aproximadamente 120 U/ml tras una incubación de 2 días en la que el pH óptimo fue de 7,4. La adición de peptona al medio de producción como única fuente de nitrógeno se acompañó de un aumento significativo de la producción de dextranasa. Del mismo modo, algunos iones metálicos, como Fe2 y Zn2 , aumentaron significativamente la producción de enzimas. Sin embargo, no hubo diferencias significativas como resultado de la adición de Cu2 . La dextranasa cruda se purificó mediante fraccionamiento con sulfato de amonio, seguido de cromatografía Sephadex G100 con una purificación de 28 veces. La dextranasa producida tenía 45 kDa con una actividad óptima a 37°C y un pH de 7. Además, la presencia de MgSO4, FeSO4 y NH4SO4 aumentó la actividad de la dextranasa purificada; sin embargo, SDS y EDTA la disminuyeron. Curiosamente, la dextranasa producida expresó una notable estabilidad de pH, estabilidad de temperatura y actividad de inhibición de la biopelícula, reduciendo la biopelícula establecida en un 86% y la formación de biopelícula en un 6%. y la formación de biopelículas en un 6%.

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