Resumen

El estadio promastigote de Leishmania reside en el intestino de la mosca de la arena, enriquecido con moléculas de azúcar. Recientemente informamos de que Leishmania donovani posee un sistema de captación de sacarosa y una reserva estable de enzima intracelular metabolizadora de sacarosa. En el presente estudio, purificamos la sacarasa intracelular casi hasta su homogeneidad y la comparamos con la sacarasa extracelular purificada. El tamaño estimado de la sucrasa intracelular es de ~112 kDa por cromatografía de filtración en gel, PAGE nativo y tinción de sustrato. Sin embargo, en SDS-PAGE, la proteína se resuelve en ~56 kDa, indicando la posibilidad de un homodímero en su estado nativo. La cinética de la sacarasa intracelular purificada muestra su mayor afinidad por el sustrato con un K m de 1,61 mM que la forma extracelular que tiene un K m de 4,4 mM. La actividad altamente específica de la sacarasa intracelular hacia la sacarosa es óptima a pH 6,0 y a 30°C. En este informe, la purificación y la caracterización de la sucrasa intracelular proporcionan pruebas de que la enzima sucrasa existe al menos en dos formas diferentes en los promastigotes de Leishmania donovani. Esta sucrasa intracelular puede contribuir a la utilización intracelular de la sacarosa transportada.

• Materias:Células Enzimas Genética molecular Neurotoxinas Virus de Inmunodeficiencia Humana - VIH
• Subjects:Cells Enzymes Molecular genetics Neurotoxins Human Immunodeficiency Virus - HIV
• Palabras claves:sucrasa intracelular, sistema de captación de sacarosa, promastigotes de leishmania donovani, intestino de la mosca de la arena, enzima metabolizadora de la sacarosa, cromatografía de filtración en gel, mayor afinidad por el sustrato, sucrasa intracelular purificada, sucrasa extracelular purificada, estadio de leishmania
• Keywords:intracellular sucrase, sucrose uptake system, leishmania donovani promastigotes, sand fly gut, sucrose metabolizing enzyme, gel filtration chromatography, higher substrate affinity, purified intracellular sucrase, purified extracellular sucrase, stage of leishmania