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Rapid Screening and Estimation of Binding Constants for Interactions of Fe with Two Metalloproteins, Apotransferrin and Transferrin, Using Affinity Mode of Capillary ElectrophoresisScreening rápido y estimación de las constantes de unión para las interacciones del Fe con dos metaloproteínas, la apotransferrina y la transferrina, utilizando el modo de afinidad de la electroforesis capilar

Resumen

En este estudio se investigó el comportamiento de interacción del Fe con la transferrina y la apotransferrina (forma libre de hierro) utilizando electroforesis capilar de afinidad. El cambio en la masa y carga de la proteína al unirse al ion metálico en el tubo capilar provocó una variación en su tiempo de migración y se utilizó para medir las interacciones de unión no covalente mediante un método de cribado rápido. La acetanilida se utilizó como marcador de flujo electroosmótico (EOF) para evitar posibles errores debido al cambio en el EOF durante el experimento. Los resultados de unión se calcularon a partir de las razones de movilidad de la proteína () y el marcador EOF (Rf) utilizando la fórmula ()/ o /. Para una comprensión más completa, se estudió la cinética de la interacción y se calcularon las constantes de unión. Los resultados mostraron que el Fe mostró una interacción insignificante con ambas proteínas a concentraciones más bajas de ion metálico (525mol/mL). Sin embargo, la transferrina mostró interacciones significativas con el ion metálico a concentraciones de 50 y 100mol/mL (=0,0114 y 0,0201, respectivamente) y la apotransferrina mostró fuertes interacciones de unión (/=0,0254 y 0,0205, respectivamente) a concentraciones relativamente más altas de Fe de 100 y 250mol/mL. Las constantes de unión de 18,968mmol y 13,603mmol se registraron para la interacción de Fe con la transferrina y la apotransferrina, respectivamente, mostrando interacciones significativas. Diferentes patrones de unión de Fe con ambas proteínas podrían atribuirse al hecho de que los sitios de unión al hierro en la transferrina ya han sido ocupados, lo cual no era el caso en la apotransferrina. El presente estudio puede servir como referencia para la investigación de interacciones proteína-ion metálico, proteína-fármaco, fármaco-ion metálico y enzima-ion metálico, y puede ser útil para proporcionar una visión preliminar sobre el desarrollo de nuevos fármacos basados en metales.

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Información del documento

  • Titulo:Rapid Screening and Estimation of Binding Constants for Interactions of Fe with Two Metalloproteins, Apotransferrin and Transferrin, Using Affinity Mode of Capillary Electrophoresis
  • Autor:Al Bratty, Mohammed; Alhazmi, Hassan A.; Javed, Sadique A.; Rehman, Zia Ur; Najmi, Asim; El-Sharkawy, Karam A.
  • Tipo:Artículo
  • Año:2021
  • Idioma:Inglés
  • Editor:Hindawi
  • Materias:Fármacos Electroforesis Microespectral Raman Espectro ultravioleta Teledetección
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