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El parásito intracelular Leishmania braziliensis es el agente causal de la leishmaniasis cutánea,enfermedad endémica de zonas tropicales,cuyos tratamientos farmacológicos son tóxicos y para la cual no se dispone de una vacuna en la actualidad. Por esta razón, el estudio de las proteínas relacionadas con el metabolismo energético del parásito es relevante dada su importancia para la supervivencia del mismo.En este estudio, utilizando como secuencia plantilla los primeros 18 residuos del extremo N-terminal de la proteína nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenilil transferasade L. braziliensis (Lb-NMNAT), se sintetizaron péptidos implementando la estrategia Fmoc/tert-Butilo en una resina Rink amida MBHA. Los péptidos se purificaron por cromatografía en columna C18 y se caracterizaron mediante RP-HPLC. La proteína recombinante 6xHisLbNMNAT se expresó en células Escherichia coliM15 y se purificó parcialmente empleando cromatografía de afinidad a metales inmovilizados. De esta proteína se confirmó su actividad enzimática a través de ensayos enzimáticos directos analizados por RP-HPLC.Los péptidos sintetizados se utilizaron para evaluar su efecto sobre la actividad enzimática de la proteína 6xHisLb-NMNAT, observándose una modulación diferencial, lo cual resulta promisorio para el diseño de herramientas quimioterapéuticas basadas en la secuencia N-terminal de la proteína Lb-NMNAT.
INTRODUCCIÓN
El parásito intracelular Leishmania braziliensis pertenece al orden Tripanosomátida y es el agente causal de la leishmaniasis, enfermedad parasitaria que afecta en promedio un millón de personas anualmente en el mundo y considerada por la OMS como una enfermedad endémica en Colombia. Las medidas de manejo existentes dependen del uso de fármacos tóxicos derivados de antimonio para combatir la infección y del control del vector para reducir la transmisión [1,2].
Debido a ello y a la ausencia de vacunas en humanos disponibles en la actualidad para combatir este parásito, el estudio de las proteínas implicadas en el metabolismo energético, indispensable para la supervivencia de este organismo, es de gran interés. Por esto se desea estudiar la proteína Lb-NMNAT, previamente identificada en el grupo de investigación [3], debido a que sintetiza el dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD), cofactor indispensable en el metabolismo del parásito [4].
Esta es una versión de prueba de citación de documentos de la Biblioteca Virtual Pro. Puede contener errores. Lo invitamos a consultar los manuales de citación de las respectivas fuentes.
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