Resumen

Una repetición CTG expandida en la 3′ UTR del gen DMPK es responsable de la distrofia miotónica tipo I (DM1). La inestabilidad somática e intergeneracional hace que la enfermedad se agrave durante la vida y en generaciones posteriores. Cada vez hay más pruebas de que la inestabilidad de las repeticiones de trinucleótidos y la progresión de la enfermedad implican una dinámica aberrante de la cromatina. Hemos explorado el entorno de la cromatina en relación con los tractos de repetición CTG expandidos en corazones de ratones transgénicos portadores del locus DM1 con diferentes longitudes de repetición. Mediante secuenciación bisulfítica detectamos abundante metilación CpG en las regiones que flanquean la repetición CTG expandida. Se postuló que la metilación CpG afectaba a la unión de CTCF, pero en nuestros ratones transgénicos la longitud de la repetición CTG no afectaba a la unión de CTCF. Detectamos una disminución significativa de los niveles de expresión de los transcritos DMPK sense y SIX5 en ratones con repeticiones CTG expandidas. La expresión del transcrito antisentido DM1 apenas se vio afectada por la expansión de las repeticiones CTG. En consonancia con la expresión génica alterada, los estudios ChIP revelaron una conformación de cromatina localmente menos activa alrededor de la repetición CTG expandida, en concreto, un menor enriquecimiento de la marca de histona activa H3K9/14Ac y un mayor enriquecimiento de H3K9Me3 (marca de cromatina represiva). También observamos la unión de PCNA alrededor de las repeticiones, un candidato que podría poner en marcha cascadas de remodelación de la cromatina en las repeticiones expandidas, afectando en última instancia a la transcripción génica y a la inestabilidad de la repetición.

• Materias:Genética Molecular Ácido ribonucleico (ARN) Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Daño del ADN Mutación genética
• Subjects:Molecular Genetic Ribonucleic acid (RNA) Polymerase chain reaction DNA Damage Genetic mutation
• Palabras claves:ctg, repetición, unión a ctcf, ratones transgénicos, niveles de expresión del transcrito six5, marca activa de histonas h3k9/14ac, transcrito antisentido dm1, dinámica aberrante de la cromatina, metilación abundante de cpg, conformación activa de la cromatina.
• Keywords:ctg, repeat, ctcf binding, transgenic mice, six5 transcript expression levels, active histone mark h3k9/14ac, dm1 antisense transcript, aberrant chromatin dynamics, abundant cpg methylation, active chromatin conformation