Antecedentes y Propósito: El pino silvestre (Pinus sylvestris L.) es el pino con mayor distribución, cubriendo todo el continente euroasiático. La detección de la variabilidad genética del pino silvestre es de gran importancia desde el punto de vista evolutivo, así como para la conservación genética. El genoma mitocondrial en el pino silvestre se hereda de manera materna y se dispersa a través de las semillas. Los estudios moleculares han indicado una alta diversidad genética en el genoma del pino silvestre, permitiendo la detección de variación entre y dentro de las poblaciones. El genoma mitocondrial posee regiones variables en el gen codificado NADH deshidrogenasa. La región variable es el intrón nad1 B/C. Los diferentes haplotipos del intrón nad1 B/C permitieron confirmar los refugios ibéricos en el Holoceno y confirmar la diversidad genética entre diferentes rodales de pino silvestre en Polonia. El propósito de este estudio fue determinar la variabilidad genética del intrón nad1 B/C en dos experimentos internacionales de procedencias de pino silvestre y en la procedencia nativa de pino silvestre en Croacia para detectar múltiples orígenes y variación de haplotipos entre procedencias.
Materiales y Métodos: Las muestras de pino silvestre se tomaron de dos experimentos internacionales de procedencias, uno establecido en Croacia (22 procedencias) y el otro en Hungría (20 procedencias), y de la procedencia nativa croata (Oficina Forestal de Vrhovine, Administración Forestal de Gospić). Las muestras de agujas se recolectaron de árboles seleccionados al azar de cada procedencia. Se recolectaron ocho muestras por procedencia para los análisis de haplotipos. El ADN se extrajo y amplificó con primers específicos para el intrón nad1 B/C del ADN mitocondrial. Los productos de PCR se analizaron mediante electroforesis en gel de agarosa y electroforesis capilar en el bioanalizador Agilent 2100.
Resultados y Conclusiones: Investigamos muestras de 42 procedencias de pino silvestre que originaron de una amplia gama en Eurasia y que se incluyeron en dos experimentos internacionales de procedencias, así como muestras de la población nativa croata. Se analizaron un total de 344 árboles individuales de pino silvestre. Los datos fueron analizados mediante electroforesis en gel de agarosa y electroforesis capilar. No detectamos variabilidad en la región mitocondrial nad1 B/C en las muestras analizadas. Todas las muestras analizadas fueron haplotipo a. Basado en nuestros datos, podemos concluir que ninguna de las muestras testeadas originó de los refugios glaciares ibéricos. Todas las muestras testeadas podrían tener su origen en refugios glaciares ubicados en la región mediterránea, los Balcanes o en el noreste de Europa. Se deberían analizar regiones más variables del ADN nuclear y del ADN mitocondrial en un mayor número de muestras para obtener datos más informativos.
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