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Selection, Identification, and Application of Aptamers against Agaricus bisporus Lectin to Establish an Aptamer-AuNPs Colorimetric Method for Detection of ABLSelección, identificación y aplicación de aptámeros contra la lectina de Agaricus bisporus para establecer un método colorimétrico aptámero-AuNPs para la detección de ABL

Resumen

La lectina del Agaricus bisporus (ABL), que es uno de los factores antinutricionales del A. bisporus, es un alérgeno importante y perjudicial para la salud humana. Debido a las deficiencias de los métodos de detección actuales, es extremadamente urgente establecer un método de detección rápido y sensible para ABL en los alimentos. Para aislar el aptámero de ssADN de ABL, se llevaron a cabo 13 rondas de selección de evolución sistemática sustractiva de ligandos por enriquecimiento exponencial (SELEX). Como resultado, se seleccionaron seis aptámeros candidatos y se examinó su afinidad y especificidad de unión mediante el método de aptámeros ligados a enzimas. Se aisló un aptámero (seq-41) contra ABL con una gran afinidad y especificidad, y se demostró que era el aptámero óptimo cuya constante de disociación alcanzaba el nivel nanomolar, Kd = 31,17 ± 0,1070 nM. Basándose en seq-41, se estableció un método colorimétrico aptámero-AuNPs para detectar ABL con un rango lineal de 0,08∼1,70 μg/mL y el límite de detección es de 0,062 μg/mL. Este estudio proporciona un nuevo método colorimétrico aptámero-AuNPs con alta sensibilidad y especificidad para la detección de ABL y una nueva estrategia para el desarrollo de métodos de detección de alérgenos fúngicos o vegetales.

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