Resumen

La toxina B es uno de los principales factores de virulencia de Clostridium difficile, una bacteria responsable de un número significativo de casos de diarrea en los centros de cuidados intensivos. Debido a la prevalencia de la diarrea inducida por C. difficile, el diagnóstico rápido y correcto es crucial en el tratamiento de la enfermedad. En este estudio, hemos empleado un estricto método de selección in vitro para identificar elementos de reconocimiento molecular (MRE) de ADN monocatenario específicos para la toxina B. Al final de la selección de 12 rondas, se identificó un MRE con alta afinidad ( K d = 47,3 nM) por la toxina B. El MRE seleccionado demostró una baja unión cruzada con la toxina B. La MRE seleccionada demostró una baja actividad de unión cruzada con las dianas negativas: albúmina sérica bovina, toxina alfa de Staphylococcus aureus, exotoxina A de Pseudomonas aeruginosa y toxina del cólera de Vibrio cholera. Se desarrolló un ensayo ELISA tipo sandwich modificado utilizando el ssDNA MRE seleccionado como elemento captador de antígeno y se logró una detección sensible de 50 nM de toxina B en preparaciones fecales humanas.

• Materias:Ácido desoxirribonucleico (ADN) Genética Molecular Técnica In Vitro Ácido ribonucleico (ARN) Ácidos nucleicos
• Subjects:Deoxyribonucleic acid (DNA) Molecular Genetic In Vitro Technique Ribonucleic acid (RNA) Nucleic acids
• Palabras claves:mre, toxina b, exotoxina a de pseudomonas aeruginosa, toxina alfa de staphylococcus aureus, ensayo elisa sándwich modificado, entornos de cuidados intensivos, elemento captador de antígenos, albúmina sérica bovina, preparaciones fecales humanas, principales factores de virulencia
• Keywords:mre, toxin b, pseudomonas aeruginosa exotoxin a, staphylococcus aureus alpha toxin, modified sandwich elisa assay, acute care settings, antigen capturing element, bovine serum albumin, human fecal preparations, major virulence factors