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Sensitive Fluorescent Sensor for Recognition of HIV-1 dsDNA by Using Glucose Oxidase and Triplex DNASensor fluorescente sensible para el reconocimiento del dsADN del VIH-1 mediante el uso de glucosa oxidasa y ADN triplex

Resumen

Se ha desarrollado un sensor fluorescente sensible para el reconocimiento de secuencias específicas de ADN de doble cadena (dsADN) en la superficie de un portaobjetos de vidrio recubierto de plata (SCGS). El oligonucleótido-1 (Oligo-1) se diseñó para ensamblarse en la superficie del SCGS y actuar como ADN de captura, y el oligonucleótido-2 (Oligo-2) se diseñó como ADN de señal. Al añadir el dsADN diana del VIH-1 (Oligo-3-Oligo-4), el ADN señal podía unirse a la superficie del vidrio recubierto de plata debido a la formación de C-GoC en la estructura triplex paralela del ADN. La glucosa oxidasa marcada con biotina (biotina-GOx) podía unirse al ADN señal a través de la interacción específica de biotina-estreptavidina, por lo que GOx se unía a la superficie del SCGS, que dependía de la concentración de ADNsd del VIH-1 diana. El GOx podía catalizar la oxidación de la glucosa y producir H2O2, y el HPPA podía oxidarse en un producto fluorescente en presencia de HRP. Por lo tanto, la concentración de dsADN diana del VIH-1 podría estimarse con la intensidad de fluorescencia. En condiciones óptimas, la intensidad de la fluorescencia era proporcional a la concentración del dsADN diana del VIH-1 en un intervalo de 10 pM a 1000 pM, y el límite de detección era de 3 pM. Además, el sensor presentaba una buena selectividad de secuencia y viabilidad, y podría aplicarse para el diagnóstico de la enfermedad del VIH en el futuro.

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