Resumen

Antecedentes. El objetivo de este estudio es explorar el método de síntesis del inmunógeno de la zearalenona (ZEN), la inmunogenicidad y las características de los anticuerpos, y sentar las bases para el establecimiento de métodos de inmunoensayo para el residuo único de ZEN y el residuo total de ZEN y sus análogos. Métodos. Basándose en la estructura molecular y los sitios activos del ZEN, se diseñaron y utilizaron el éster activo de oxima (OAE), el anhídrido mixto de condensación (CMA), el formaldehído (FA) y el método del éter diglicidílico de 1,4-butanediol (BDE) para la síntesis del inmunógeno (ZEN-BSA). Los inmunógenos se identificaron mediante los espectros infrarrojo (IR) y ultravioleta (UV) y la electroforesis en gel (SDS-PAGE) y luego se utilizaron para inmunizar ratones Balb/c y preparar el anticuerpo policlonal ZEN (ZEN pAb). Los títulos y la sensibilidad del ZEN pAb se determinaron mediante ELISA indirecto no competitivo (inELISA) y ELISA indirecto competitivo (icELISA), respectivamente, y su especificidad se evaluó mediante la prueba de reacción cruzada (CR). Resultados. Se sintetizó con éxito el ZEN-BSA, y las relaciones de unión molecular del ZEN a la BSA fueron de 17,2 :1 (OAE), 14,6 :1 (CMA), 9,7 :1 (FA), y 8,3 :1 (BDE), respectivamente. Los títulos más altos de ZEN pAb en el ELISA de cada grupo fueron 1 : (6,4 × 103) (OAE), 1 : (3,2 × 103) (CMA), 1 : (1,6 × 103) (FA) y 1 : (1,6 × 103) (BDE), respectivamente. Las concentraciones de inhibición del 50% (IC50) para ZEN por icELISA de cada grupo fueron 11,67 μg/L (OAE), 16,29 μg/L (CMA), 20,92 μg/L (FA) y 24,36 μg/L (BDE), respectivamente. Los pAb de ZEN de los ratones inmunizados con ZEN-BSA (OAE) y ZEN-BSA (CMA) tenían una amplia especificidad de clase para ZEN y sus análogos. Las RC de los pAb de ZEN con α-ZAL, β-ZAL, α-ZOL, β-ZOL y ZON fueron del 36,53%, 16,98%, 64,33%, 20,16% y 10,66%, respectivamente. Los pAb de ZEN de los ratones inmunizados con ZEN-BSA (FA) y ZEN-BSA (BDE) tuvieron una alta especificidad para ZEN. Las RC de los pAb de ZEN con sus análogos fueron todas inferiores al 1,0%. Conclusión. Este estudio demostró que la preparación de la clase de anticuerpos de amplia especificidad de ZEN y sus análogos puede lograrse inmunizando animales con el inmunógeno ZEN-BSA preparado por el método OAE, mientras que la preparación de anticuerpos altamente específicos puede lograrse inmunizando animales con el inmunógeno ZEN-BSA preparado por el método FA. Estos hallazgos sientan las bases materiales y técnicas para el inmunoensayo del residuo único de ZEN y del residuo total de ZEN y sus análogos.

• Materias:Análisis cromatográfico Nanopartículas Fitoquímicos Análisis fitoquímico Método espectrofotométrico
• Subjects:Chromatographic analysis Nanoparticles Phytochemicals Phytochemical analysis Spectrophotometric method
• Palabras claves:zen, zen pab, bsa, cr o zen, cma, análogo, bde, oae, fa, residuos individuales
• Keywords:zen, zen pab, bsa, cr of zen, cma, analog, bde, oae, fa, single residues