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Immobilization Techniques and Integrated Signal Enhancement for POC Nanocolor Microfluidic DevicesTécnicas de inmovilización y mejora integrada de la señal para dispositivos microfluídicos nanocolor POC

Resumen

Los dispositivos microfluídicos nanocolor de absorción mejorada por resonancia (REA) son nuevas y prometedoras plataformas de bioensayo que emplean conjugados proteínicos de nanopartículas (NP) para la inmunodetección de marcadores de interés médico en muestras biológicas como sangre, orina y saliva. El componente central de un dispositivo de prueba REA es un chip PET recubierto con finas capas de aluminio y SiO2, sobre las que se inmovilizan moléculas biorreactivas. Al añadir una muestra que contiene el analito de interés, se forma en el dispositivo de prueba un complejo NP-proteína-analito que se captura en el chip REA, por ejemplo, mediante la interacción estreptavidina-biotina. De este modo, se genera un símbolo coloreado que permite la lectura óptica. Para aumentar la sensibilidad del ensayo se puede utilizar el realce con plata de las nanopartículas unidas. En este trabajo demostramos que la inmovilización por adsorción mediante una capa intermedia polimérica catiónica es una técnica rápida y competitiva para la unión de la proteína de captura estreptavidina a superficies planas de SiO2, como los biochips de REA. Además, presentamos el desarrollo de una tecnología de mejora de la plata que funciona incluso en presencia de altas concentraciones de cloruro como las que pueden encontrarse en las muestras biológicas. Los reactivos de realce de plata pueden integrarse en la plataforma de ensayo microfluídica para ser liberados al añadir la muestra. De este modo, se puede realizar un ensayo altamente sensible en un solo paso.

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