Resumen

Aquí se presenta un concepto para la selección in vitro de ARNt supresores. Utiliza un pool de plantillas de dsADN en micelas compartimentadas de agua en aceite. La plantilla contiene un desencadenante de transcripción/traducción, un codón de parada ámbar, y otro desencadenante de transcripción para el gen aleatorizado de bucle anticodón o anticodón para tRNASer. Tras la transcripción se generan dos tipos de ARN, un ARNt y un ARNm traducible (ARNm-ARNt). Cuando el ARNt suprime el codón de parada (UAG) del ARNm, la proteína de longitud completa obtenida tras la traducción permanece unida al ARNm (despliegue ribosómico de lectura) que contiene la secuencia del ARNt. De este modo, se pueden seleccionar (amplificar) los ARNt supresores activos y leer sus secuencias. El anticodón enriquecido (CUA) era complementario al codón de parada UAG y el bucle de anticodón enriquecido era el mismo que el del tRNASer natural.

• Materias:Genética molecular Ácido ribonucleico (ARN) Genómica Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos
• Subjects:Molecular genetics Ribonucleic acid (RNA) Genomics Polymerase chain reaction Nucleic acids
• Palabras claves:mrna, trna, trnas supresores activos, uag, transcripción, bucle anticodón, agua compartimentada, plantillas dsdna, anticodón enriquecido, proteína de longitud
• Keywords:mrna, trna, active suppressor trnas, uag, transcription, anticodon loop, compartmentalized water, dsdna templates, enriched anticodon, length protein