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An Optimized High Throughput Clean-Up Method Using Mixed-Mode SPE Plate for the Analysis of Free Arachidonic Acid in Plasma by LC-MS/MSUn método optimizado de limpieza de alto rendimiento utilizando una placa SPE de modo mixto para el análisis de ácido araquidónico libre en plasma por LC-MS/MS

Resumen

Se desarrolló un método de preparación de muestras de alto rendimiento utilizando la extracción en fase sólida (SPE) de modo mixto en formato de placa de 96 pocillos para la determinación de ácido araquidónico libre en plasma por LC-MS/MS. El plasma se mezcló con 3 queo de amoníaco y se cargó en cada pocillo de la placa de 96 pocillos. Después de lavar con agua y metanol secuencialmente, se utilizó 3% de ácido fórmico en acetonitrilo para eluir el ácido araquidónico. La fracción recogida se inyectó en una columna de fase inversa a 30°C con fase móvil de acetonitrilo/agua (70 : 30, v/v) y se detectó mediante LC-MS/MS acoplada a ionización por electrospray (ESI) en modo de monitorización de reacción múltiple (MRM). La curva de calibración osciló entre 10 y 2500 ng/mL con suficiente linealidad (r 2 = 0,9999). Las recuperaciones estuvieron en el rango de 99.38% a 103.21% con RSD menor al 6%. El límite de detección es de 3 ng/mL.

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