Resumen

Para realizar estudios de molécula única de la ARN polimerasa T7, es crucial visualizar una ARN polimerasa T7 individual, por ejemplo, mediante una señal fluorescente. Presentamos un nuevo complejo que combina dos funciones moleculares diferentes, una ARN polimerasa T7 activa y una nanopartícula altamente luminiscente, un punto cuántico. El complejo tiene la ventaja de ambos constituyentes: el complejo puede circular a lo largo del ADN y ser visualizado simultáneamente, tanto a nivel de conjunto como de molécula única. El marcaje se realizó mediante la biotinilación in vivo de una ARN polimerasa T7 marcada con His y la posterior unión de un punto cuántico recubierto de estreptavidina. Nuestra técnica permite purificar fácilmente las ARN polimerasas T7 marcadas con puntos cuánticos a partir de los reactivos. Además, la conjugación no altera la funcionalidad de la polimerasa; conserva la capacidad de unirse y transcribir.

• Materias:Biotecnología Análisis electroquímico Nanotecnología Nanoestructuras Nanomateriales
• Subjects:Biotechnology Electrochemical analysis Nanotechnology Nanostructures Nanomaterials
• Palabras claves:t7 rna polimerasa, punto cuántico, t7 rna polimerasa activa, t7 rna polimerasa individual, t7 rna polimerasas, punto cuántico recubierto, diferentes funciones moleculares, complejo, fácil purificación, señal fluorescente
• Keywords:t7 rna polymerase, quantum dot, active t7 rna polymerase, individual t7 rna polymerase, t7 rna polymerases, coated quantum dot, different molecular functions, complex, easy purification, fluorescent signal